Types de tests biochimiques, leur importance et leur importance

Le tests biochimiques en microbiologie, il s'agit d'un ensemble de tests chimiques effectués sur les microorganismes présents dans un échantillon afin de les identifier; Ces microorganismes sont généralement des bactéries. Un grand nombre de tests biochimiques sont disponibles pour un microbiologiste.

Cependant, le choix de ces tests est basé sur des résultats préliminaires, tels que le motif de coloration de Gram et les caractères de croissance, qui permettent d'affecter les bactéries à une catégorie particulière. Les tests biochimiques reposent principalement sur les propriétés métaboliques de chaque type de bactérie.

Toutes les bactéries n'ont pas les mêmes propriétés. On recherche donc si elles contiennent une enzyme particulière en ajoutant le substrat et en attendant que la réaction se produise. Généralement, cette détermination est donnée par un changement de couleur ou de pH dans le milieu de culture.

Souvent, moins de 15 tests biochimiques sont nécessaires pour l'identification fiable d'une bactérie jusqu'au niveau de l'espèce. Effectuer plus de tests biochimiques peut augmenter la confiance dans l'identification.

La plupart de ces tests biochimiques sont réalisés dans le sérum ou le plasma sanguin. Cependant, ils peuvent également être réalisés dans d'autres sécrétions biologiques telles que: urine, liquide céphalo-rachidien, liquide pleural et fèces, entre autres.

Index

• 1 classification
  • 1.1 Universel
  • 1.2 Différentiels
  • 1.3 spécifique
• 2 types de tests biochimiques
  • 2.1 Le test de la catalase
  • 2.2 Le test de l'oxydase
  • 2.3 Test d'agar au mannitol salé (MSA)
  • 2.4 test de la coagulase
  • 2.5 Le test à l'uréase
• 3 À quoi servent les tests biochimiques?
• 4 importance
• 5 références

Classification

Les tests biochimiques peuvent être classés en 3 groupes:

Universel

Ce sont les tests qui peuvent être effectués sur n'importe quel échantillon et qui guident le microbiologiste sur les tests biochimiques suivants qui doivent être effectués pour obtenir une identification fiable.

Exemple

Le test de la catalase et de l'oxydase.

Différentiels

Ce sont les tests effectués pour identifier les microorganismes présents dans l'échantillon jusqu'au niveau de l'espèce.

L'identification est effectuée sur la base des résultats d'une combinaison de tests, car les résultats individuels ne sont pas suffisamment informatifs pour permettre l'identification.

Exemple

Tests IMViC et tests d'utilisation du sucre.

Spécifique

Ce sont des tests spécifiques pour un ensemble particulier d'espèces ou pour le sous-type d'une espèce. Ces tests sont généralement effectués pour confirmer ou identifier le niveau de la sous-espèce. Les tests individuels sont informatifs par eux-mêmes.

Exemple

Le test γ-glutamyl aminopeptidase.

Types de tests biochimiques

Le test de la catalase

Le test à la catalase est un test visant à démontrer la présence de l'enzyme catalase en décomposant le peroxyde d'hydrogène en oxygène et en eau. Une petite quantité de bactéries est ajoutée à une goutte de peroxyde d'hydrogène (3%) sur la lame.

Le test de la catalase est un test simple utilisé par les microbiologistes pour aider à identifier les espèces bactériennes et à déterminer la capacité de certains microbes à décomposer le peroxyde d'hydrogène en produisant l'enzyme catalase.

Si des bulles d'oxygène sont observées, cela signifie que la bactérie possède l'enzyme catalase, car elle catalyse la décomposition du peroxyde d'hydrogène en oxygène et en eau. On dit alors que l'organisme est positif en catalase (par exemple: Staphylococcus aureus).

Le test de l'oxydase

Ce test est utilisé pour identifier les micro-organismes contenant l'enzyme cytochrome oxydase (importante dans la chaîne de transport des électrons). Il est couramment utilisé pour distinguer les familles Enterobacteriaceae et Pseudomadaceae.

La cytochrome oxydase transfère les électrons de la chaîne de transport d'électrons à l'oxygène (l'accepteur final d'électrons) et le réduit en eau. Dans le test à l'oxydase, des molécules d'électrons de donneur et d'accepteur artificielles sont fournies.

Lorsque le donneur d'électrons est oxydé par l'action de la cytochrome oxydase, le milieu devient violet foncé et est considéré comme un résultat positif. Le microorganisme Pseudomonas aeruginosa est un exemple de bactérie à oxydase positive.

Test de gélose au mannitol salé (MSA)

Ce type de test est à la fois sélectif et différentiel. Le MSA sélectionnera des organismes capables de vivre dans des environnements à forte concentration en sel, tels que des espèces de Staphylocoque contrairement aux espèces de Streptocoque, dont la croissance est inhibée dans ces conditions.

Le composant différentiel dans ce test est le sucre mannitol. Les organismes capables d'utiliser le mannitol comme source de nourriture produiront des sous-produits de fermentation acides qui abaissent le pH du milieu.

L'acidité du milieu provoque le jaunissement de l'indicateur de pH, le rouge phénol. Des exemples d'espèces bactériennes pouvant être différenciées par cette méthode sont: Staphylococcus aureus (positif car il fermente le mannitol) et Staphylococcus epidermidis (négatif car le mannitol ne fermente pas).

Test de la coagulase

La coagulase est une enzyme qui aide à coaguler le plasma sanguin. Ce test est effectué sur des bactéries positives à Gram positif et positives à la catalase pour identifier Staphylococcus aureus (coagulase positive). En fait, la coagulase est un facteur de virulence de cette espèce bactérienne.

La formation de caillots autour d'une infection causée par cette bactérie le protège probablement de la phagocytose. Ce test est très utile lorsque vous souhaitez différencier Staphylococcus aureus d'autres espèces de Staphylocoque qui sont la coagulase négative

Le test de l'uréase

Ce test est utilisé pour identifier les bactéries capables d'hydrolyser l'urée, en utilisant l'enzyme uréase. Il est couramment utilisé pour distinguer le genre Proteus d'autres bactéries entériques.

L’hydrolyse de l’urée produit l’ammoniac parmi ses produits. Cette base faible augmente le pH du milieu au-dessus de 8,4 et l'indicateur de pH (rouge phénol) passe du jaune au rose. Un exemple de bactérie uréase positive est Proteus mirabilis.

Quels sont les tests biochimiques?

Les tests biochimiques en microbiologie permettent de diagnostiquer les maladies causées par des microbes et de suivre les traitements administrés pour les combattre. De plus, ils sont utilisés pour le dépistage des maladies infectieuses et pour leur pronostic.

L'identification biochimique des microorganismes donne une idée de ce que ces microorganismes sont capables de faire, en permettant la discrimination de différentes souches d'une même espèce par des profils biochimiques spécifiques.

Les différences dans les activités enzymatiques spécifiques renseignent sur l'écologie, la physiologie ou l'habitat naturel du microorganisme, qui dans certains cas peuvent être considérés comme des informations importantes.

Importance

Les différences structurelles en ce qui concerne la forme, la taille et la disposition des bactéries aident très peu dans le processus d'identification, car de nombreuses espèces de bactéries ont une forme, une taille et un agencement similaires.

Pour cette raison, l'identification des bactéries repose essentiellement sur les différences de leurs activités biochimiques.

Chaque espèce de bactérie possède un ensemble bien défini d'activités métaboliques différentes de toutes les autres espèces. Ces "empreintes" biochimiques sont des propriétés contrôlées par des enzymes bactériennes.

Ainsi, les tests biochimiques sont importants car ils aident le chercheur à identifier correctement les agents pathogènes présents dans un échantillon et, de cette manière, à pouvoir recommander le traitement approprié au patient.

Références

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